Uracil-DNA Glycosylase (Low Temperature)
低温尿嘧啶DNA糖基化酶
| 目录号 | 规格 | 单价 |
|---|---|---|
| LU201-01 | 100 units | 790 |
| LU201-02 | 500 units | 3170 |
产品详情介绍
本产品低温UDG (Uracil-DNA Glycosylase，尿嘧啶-DNA糖基化酶) 是来源于嗜冷海洋细菌经改造后后于大肠杆菌(Escherichia coli) 表达纯化的重组蛋白。UDG酶能有效地水解单链或双链 DNA 中的尿嘧啶 (dU) 碱基和脱氧核糖之间的N-糖苷键发生水解，从而释放游离尿嘧啶，产生缺嘧啶位点，主要用于消除含dU的PCR产物带来的气溶胶污染。本产品在高温或高pH下，极易水解断裂。与常规UDG酶相比，本产品可在较低温度 (20℃)下起作用，即常温配制qPCR或者qRT-PCR反应体系时就能对污染的含dU的模板进行降解。该酶对反转录时产生的含dU的cDNA(DNA/RNA杂交形式) 没有降解功能。本产品在大多数PCR反应缓冲液中都有很高的活性，适用于PCR/qPCR、RT-PCR/qRT-PCR、LAMP/RT-LAMP。
反应速度快
以新型冠状病毒反转录后的 cDNA 为模板，dUTP 代替 dTTP 进行 PCR 扩增，扩增产物进行10-9、10-8、10-7、10-6 倍稀释，加入 TransGen UDG消化， qPCR 检测消化效果，结果显示， TransGen 产品反应速度快，1分钟即可对污染的含 dU 的模板进行降解。
消化能力强
以非洲猪瘟病毒(ASFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)扩增的含U-PCR产物和新型冠状病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)反转录后扩增的含U-PCR产物为模板，加入0 UDG、TransGen UDG (2.5 U/mL)、Company N UDG (2.5 U/mL)消化，qPCR 检测消化效果。结果显示，TransGen UDG消化能力强，能更有效去除体系中的非模板来源的DNA污染。(ΔCq表示 TransGen UDG、Company N UDG 与 0 UDG三种反应体系的 Cq差值，差值越大，表示UDG消化能力越强）
PCR反应抑制低
以非洲猪瘟病毒 DNA 为模板，采用 0 UDG、TransGen UDG (2.5 U/mL)、Company N UDG (2.5 U/mL)三种体系进行 qPCR ，结果表明，TransGen UDG与Company N UDG在工作浓度下均无明显的PCR抑制现象。
新型冠状病毒
以高浓度 (26500 copies/mL)和低浓度 (200 copies /mL)的新冠假病毒RNA为模板，采用 0 UDG、TransGen UDG (2.5 U/mL)、Company N UDG (2.5 U/mL)三种体系进行 qRT-PCR ，结果表明，TransGen UDG与Company N UDG在工作浓度下均无明显的PCR抑制现象。
以新冠假病毒RNA为模板，采用 40 U/mL和 80 U/mL的 TransGen UDG两种体系进行 qRT-PCR ，结果表明，TransGen UDG 浓度达到 80 U/mL时 (相当于50 μL体系加入了4 Units UDG)对整个PCR反应也无明显抑制。
对含U的cDNA扩增无影响
分别用不含 U 和含 U 的 cDNA 为模板，在反应体系中分别加入0 UDG、TransGen UDG (2.5 U/mL)、Company N UDG (2.5 U/mL)，qPCR 检测 UDG 对含 U 的 cDNA 扩增的影响，结果显示， TransGen 低温 UDG 对含U的cDNA扩增无影响。
